人富含 NK 活性大颗粒**细胞(LGL)的纯化试剂盒实验方法|佰易聚生物商城
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人富含 NK 活性大颗粒**细胞(LGL)的纯化试剂盒实验方法

人富含 NK 活性大颗粒**细胞(LGL)的纯化试剂盒实验方法

 

【产品规格】

 100ml/Kit

 【产品组成】

 为方便广大用户使用,试剂内容如下:

名称

产品编号

规格

 A

 密度梯度www.3499.com原液

 NK2011H-A

 100ml





 B

 梯度制备稀释液

 NK2011H-B

 100ml





 C

 说明书

 

 1份






【实验前准备】 

 

适用仪器:*大离心力可达 1200g 的水平转子离心机

 

【检验方法】

 

全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。

 

1. 收集从外周血中分离的单个核细胞(人全血单个核细胞www.3499.com,产品货号;LDS1075): 1×108 个悬于 1ml 无血清培养基中。

2. 梯度分离溶液制备,使用使用梯度制备稀释液参考下表将原液稀释至所需浓度:







 原液浓度(%)

83% 

 79%

 73%

 70%

 66%







 比重(g/ml)

 1.067

 1.064

 1.061

 1.058

 1.056

 

3. 梯度分离层的制备:将梯度www.3499.com由高密度至低密度逐层加入至 10ml 离心管(试管)内,每层约 1.2-1.5ml 加入后应可见明显的梯度界面,同时标记 70%层上部界面及 73% 底部界面位置。

 4. 上样:将单个核细胞单细胞悬液 1ml 加至梯度界面上。

 5. 离心:400g,离心 20-25min。

 6. 取样:吸取 73% 70%溶液界面及上下两层分离溶液(即步骤标记位置之间的溶液),

 

细胞经洗涤后供后续试验。

 

注:样本量加大时请客户按选取对应耗材且按比例增加试剂用量,但应注意加入试剂及样本

 

后总体积不超过离心管总体积的 2/3。

 

【注意事项】

 

1. 实验全过程需在 20℃±2℃下进行,否则影响离心效果。

 

2. 由于多层分离溶液之间密度差别不大,因此离心机加速、降速时要慢,要平稳。

3. 试剂瓶盖需盖紧,防止蒸发和污染。

【储存条件及有效期】常温保存,有效期年。本品易感染**,需无菌条件操作。无菌条件下操作,启封后置常温保存。如 4℃保存,本www.3499.com易出现白色结晶,影响分离效果。